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3-24
(一)何時(shí)須更換培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素。視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中可以添加抗生素。按1%體積分?jǐn)?shù)加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素),使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100U/mL和100μ/mL。(二)貼壁細(xì)胞傳代時(shí)所使用的trypsin-EDTA濃度及相應(yīng)處理一般使用的trypsin-EDTA濃度為0.25%trypsin-0.53mMEDTA.4Na。*次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保...
3-21
細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)??纱罂尚。慵瓤梢允褂蒙锓磻?yīng)器,也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今,利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞,因?yàn)檫@有助于研究多個(gè)動(dòng)態(tài)變量,減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間,并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板,還有一些特殊的微孔板被開(kāi)發(fā)出來(lái),助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。市場(chǎng)上的細(xì)胞培養(yǎng)板可不少,如何選擇合適的呢?在這篇文章中,BrandTechScientific的產(chǎn)品專(zhuān)家介紹了細(xì)胞培養(yǎng)中塑料制品的選購(gòu)要點(diǎn)。在他們看來(lái),我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。1.孔...
3-14
細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類(lèi)型有細(xì)菌污染、霉菌污染、支原體污染、黑膠蟲(chóng)污染、真菌污染、原蟲(chóng)污染等。那么它們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)中污染的特點(diǎn)如何以及相應(yīng)的解決方法是什么呢?小編為大家整理如下,希望對(duì)大家有用哦~1.細(xì)菌:細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會(huì)渾濁變黃,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。解決方法:和儲(chǔ)存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話(huà)有可能造仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時(shí)放氣時(shí)間足夠,壓力足夠!尤其是成儲(chǔ)存液污染,一定要...
3-10
(一)冷凍管應(yīng)如何解凍取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管的爆裂。(二)細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),DMSO如何處理在細(xì)胞解凍之后,可直接離心去除DMSO,用新鮮的培養(yǎng)基懸浮后直接放入含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),如此可避免解凍后細(xì)胞生長(zhǎng)受到DMSO影響。(三)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同的培養(yǎng)基每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)...
3-6
導(dǎo)語(yǔ)細(xì)胞培養(yǎng)的路上,有多虐心就有多少需要值得注意的地方。小小的平皿之中,細(xì)胞點(diǎn)點(diǎn),引無(wú)數(shù)英雄競(jìng)掛東南枝。正所謂“萬(wàn)事開(kāi)頭難”,即便是細(xì)胞復(fù)蘇與保存這兩件看似簡(jiǎn)單的事情,也能造成實(shí)驗(yàn)汪內(nèi)心無(wú)比巨大的陰影面積。好在小魚(yú)這里有本細(xì)胞培養(yǎng)秘籍,可讓細(xì)胞這個(gè)熊孩子*變?yōu)槟愕馁N心小棉襖。其實(shí),剛剛復(fù)蘇的細(xì)胞就像是剛剛出生的baby,非常脆弱,需要各位小伙伴的細(xì)心呵護(hù),不然,細(xì)胞就會(huì)被我們花樣玩死。為了避免細(xì)胞不明不白的掛掉,我們就要對(duì)細(xì)胞的各種習(xí)性了如指掌。1.俗語(yǔ)道,到什么山上唱什么歌...
2-13
細(xì)胞膜的主要功能:細(xì)胞膜對(duì)于細(xì)胞整個(gè)結(jié)構(gòu)的完整性以及細(xì)胞的正常生命活動(dòng)都是至關(guān)重要的。其功能概括起來(lái)有以下幾個(gè)方面。(1)細(xì)胞的界膜,這是細(xì)胞膜zui重要的功能。無(wú)論是真核細(xì)胞還是原核細(xì)胞,都必定有一個(gè)由一定膜結(jié)構(gòu)形成的界膜,不然的話(huà)就不會(huì)有細(xì)胞存在。細(xì)胞膜的出現(xiàn)使生命起源到了細(xì)胞的形式,也保證了細(xì)胞生命活動(dòng)的正常進(jìn)行。細(xì)胞膜的出現(xiàn)使各種生物大分子集中到一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的微環(huán)境中,這樣有利于細(xì)胞的物質(zhì)和能量代謝,也有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育。(2)物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸膜的存在使細(xì)胞成為一個(gè)相...
12-26
食用菌是指子實(shí)體碩大、可供食用的蕈菌(大型真菌),通稱(chēng)為蘑菇。中國(guó)已知的食用菌有350多種,其中多屬擔(dān)子菌亞門(mén),常見(jiàn)的有:香菇、草菇、蘑菇、木耳、銀耳、猴頭、竹蓀、松口蘑(松茸)、口蘑、紅菇、靈芝、蟲(chóng)草、松露、百靈和牛肝菌等;少數(shù)屬于子囊菌亞門(mén),其中有:羊肚菌、馬鞍菌、塊菌等。上述真菌分別生長(zhǎng)在不同的地區(qū)、不同的生態(tài)環(huán)境中。1.食用菌(ediblefungus):可供人類(lèi)食用的大型真菌。具體地說(shuō),食用菌是可供人食用的蕈菌;蕈菌,是指能形成大型的肉質(zhì)(或膠質(zhì))子實(shí)體或菌核組織的...
12-24
白血病細(xì)胞株通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物也就是說(shuō),它是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。白血病細(xì)胞株的凍存及復(fù)蘇:白血病細(xì)胞株的凍存:為避免污染造成的損失,zui小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:◆包含10%...
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