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ATCC細胞株應(yīng)用廣泛

更新時間:2016-01-26      點擊次數(shù):2793
    ATCC細胞株宜于微生物生長發(fā)育、節(jié)省原料等優(yōu)勢,一般在培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面應(yīng)用廣泛。
  ATCC細胞株的配制
  (1)稱量和熬煮
  按細胞株配方逐一稱取去皮土豆。土豆切成小塊放入鍋中,加水1000ml,在加熱器上加熱至沸騰,維持20-30min,用可用2層紗布趁熱在量杯上過濾,濾渣棄取。濾液補充水分到1000ml。
  (2)加熱溶解
  把濾液放入鍋中,加入葡萄糖20g,瓊脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉網(wǎng)上,小火加熱,并用玻棒不斷攪拌,以防瓊脂糊底或溢出,待瓊脂*溶解后,再補充水分至所需量。
  (3)分裝
  按實訓要求,將配制的細胞株分裝入試管或500ml三角瓶內(nèi)。分裝時可用三角漏斗以免使細胞株沾在管口或瓶口上造成污染。
  分裝量:ATCC細胞株約為試管高度的1/5,滅菌后制成斜面,分裝入三角瓶內(nèi)以不超過其容積的一半為宜;半固體細胞株以試管高度的1/3為宜,滅菌后垂直待凝。
  (4)加棉塞
  細胞株分裝完畢后,在試管口或三角燒瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或試管帽等),以阻止外界微生物進入細胞株內(nèi)造成污染,并保證有良好的通氣性能。
  (5)包扎
  加塞后,將全部試管用麻繩或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一層牛皮紙,以防止滅菌時冷凝水潤濕棉塞,其外再用一道線繩或橡皮筋扎好,用記號筆注明細胞株名稱、組別、配制日期。
  ATCC細胞株配制注意事項
  1.細胞株經(jīng)滅菌后,必須放在37C溫箱培養(yǎng)24h,無菌生長者方可使用。
  2.ATCC細胞株一般不需要調(diào)pH。對于要調(diào)節(jié)pH的細胞株,一般用pH試紙測定其pH。如果細胞株偏酸或偏堿時,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液進行調(diào)節(jié)。調(diào)節(jié)時應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部過酸或過堿破壞細胞株成分。
  3.細胞株在使用時也可以做成不含瓊脂的液體細胞株,用于菌類的震蕩培養(yǎng)。
  4.ATCC細胞株也可以加入氯霉素或土霉素,加入量為0.2g/L細胞株,主要是為了抑制細菌的生長,減少干擾性。
 
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